1. Objectiu: Aquest procediment té com a objectiu proporcionar un procediment estandarditzat per a operacions asèptiques i protecció de sales estèrils.
2. Àmbit d'aplicació: laboratori d'anàlisis biològiques
3. Persona responsable: Supervisor de control de qualitat
4. Definició: Cap
5. Precaucions de seguretat
Realitzeu operacions estrictament asèptiques per evitar la contaminació microbiana; els operadors han d'apagar la làmpada UV abans d'entrar a la sala estèril.
6. Procediments
6.1. La sala estèril ha d'estar equipada amb una sala d'operacions estèril i una sala intermèdia. La neteja de la sala d'operacions estèril ha d'arribar a la classe 10000. La temperatura interior s'ha de mantenir entre 20 i 24 °C i la humitat entre el 45 i el 60 %. La neteja de la bancada neta ha d'arribar a la classe 100.
6.2. La sala estèril s'ha de mantenir neta i està estrictament prohibit acumular restes per evitar la contaminació.
6.3. Eviteu estrictament la contaminació de tots els equips d'esterilització i medis de cultiu. Aquells que estiguin contaminats han de deixar d'utilitzar-los.
6.4. La sala estèril ha d'estar equipada amb desinfectants de concentració de treball, com ara una solució de cresol al 5%, alcohol al 70%, solució de clormetionina al 0,1%, etc.
6.5. La sala estèril s'ha d'esterilitzar i netejar regularment amb el desinfectant adequat per garantir que la neteja de la sala estèril compleixi els requisits.
6.6. Tots els instruments, instruments, plats i altres articles que s'hagin de portar a la sala estèril s'han d'embolicar hermèticament i esterilitzar amb els mètodes adequats.
6.7. Abans d'entrar a la sala estèril, el personal s'ha de rentar les mans amb sabó o desinfectant i després canviar-se a roba de treball especial, sabates, barrets, mascaretes i guants a la sala tamponada (o netejar-se les mans de nou amb etanol al 70%) abans d'entrar a la sala estèril. Realitzar les operacions a la cambra bacteriana.
6.8. Abans d'utilitzar una sala estèril, cal encendre la làmpada ultraviolada de la sala estèril durant més de 30 minuts per a la irradiació i l'esterilització, i alhora s'ha d'encendre la taula de neteja per al bufat d'aire. Un cop finalitzada l'operació, s'ha de netejar la sala estèril a temps i després esterilitzar-la amb llum ultraviolada durant 20 minuts.
6.9. Abans de la inspecció, l'embalatge exterior de la mostra de prova s'ha de mantenir intacte i no s'ha d'obrir per evitar la contaminació. Abans de la inspecció, utilitzeu boles de cotó amb alcohol al 70% per desinfectar la superfície exterior.
6.10. Durant cada operació, s'ha de fer un control negatiu per comprovar la fiabilitat del funcionament asèptic.
6.11. Quan absorbeixis líquid bacterià, has de fer servir una ventosa per absorbir-lo. No toquis la palleta directament amb la boca.
6.12. L'agulla d'inoculació s'ha d'esterilitzar amb flama abans i després de cada ús. Després de refredar-se, es pot inocular el cultiu.
6.13. Les palletes, els tubs d'assaig, les plaques de Petri i altres estris que continguin líquid bacterià s'han de submergir en una galleda d'esterilització amb solució Lysol al 5% per a la desinfecció, i s'han de treure i esbandir després de 24 hores.
6.14. Si es vessa líquid bacterià sobre la taula o el terra, heu d'abocar immediatament una solució d'àcid carbòlic al 5% o Lysol al 3% sobre la zona contaminada durant almenys 30 minuts abans de tractar-la. Quan la roba de treball i els barrets estiguin contaminats amb líquid bacterià, s'han de treure immediatament i rentar després d'esterilitzar-los amb vapor d'alta pressió.
6.15. Tots els articles que continguin bacteris vius s'han de desinfectar abans de rentar-los sota l'aixeta. Està estrictament prohibit contaminar el clavegueram.
6.16. El nombre de colònies a la sala estèril s'ha de comprovar mensualment. Amb la taula neta oberta, agafeu diverses plaques de Petri estèrils amb un diàmetre interior de 90 mm i injecteu-hi asèpticament uns 15 ml de medi de cultiu d'agar nutritiu que s'ha fos i refredat a uns 45 °C. Després de la solidificació, col·loqueu-les cap per avall a 30-35 °C. Incubeu-les durant 48 hores en una incubadora de 30-35 °C. Després de comprovar l'esterilitat, agafeu de 3 a 5 plaques i col·loqueu-les a l'esquerra, al mig i a la dreta de la posició de treball. Després d'obrir la tapa i exposar-les durant 30 minuts, col·loqueu-les cap per avall en una incubadora de 30-35 °C durant 48 hores i traieu-les. Examineu-les. El nombre mitjà de bacteris diversos a la placa en una zona neta de classe 100 no ha de superar 1 colònia, i el nombre mitjà en una sala neta de classe 10000 no ha de superar les 3 colònies. Si se supera el límit, la sala estèril s'ha de desinfectar a fons fins que les inspeccions repetides compleixin els requisits.
7. Consulteu el capítol (Mètode d'inspecció d'esterilitat) a "Mètodes d'inspecció d'higiene de medicaments" i "Pràctiques operatives estàndard de la Xina per a la inspecció de medicaments".
8. Departament de Distribució: Departament de Gestió de Qualitat
Guia tècnica per a sales blanques:
Després d'obtenir un entorn estèril i materials estèrils, hem de mantenir un estat estèril per poder estudiar un microorganisme específic conegut o utilitzar les seves funcions. En cas contrari, diversos microorganismes de l'exterior s'hi poden barrejar fàcilment. El fenomen de la barreja de microorganismes irrellevants de l'exterior s'anomena bacteris contaminants en microbiologia. La prevenció de la contaminació és una tècnica crítica en el treball microbiològic. L'esterilització completa, d'una banda, i la prevenció de la contaminació, de l'altra, són dos aspectes de la tècnica asèptica. A més, hem d'evitar que els microorganismes en estudi, especialment els microorganismes patògens o els microorganismes modificats genèticament que no existeixen a la natura, s'escapen dels nostres recipients experimentals a l'entorn extern. Per a aquests propòsits, en microbiologia, hi ha moltes mesures.
Una sala estèril sol ser una sala petita especialment preparada en un laboratori de microbiologia. Es pot construir amb làmines i vidre. L'àrea no ha de ser massa gran, d'uns 4-5 metres quadrats, i l'alçada ha de ser d'uns 2,5 metres. S'ha de preparar una sala intermèdia fora de la sala estèril. La porta de la sala intermèdia i la porta de la sala estèril no han d'estar orientades en la mateixa direcció per evitar que el flux d'aire porti bacteris diversos. Tant la sala estèril com la sala intermèdia han de ser hermètiques. Els equips de ventilació interior han de tenir dispositius de filtració d'aire. El terra i les parets de la sala estèril han de ser llisos, difícils d'acumular brutícia i fàcils de netejar. La superfície de treball ha de ser anivellada. Tant la sala estèril com la sala intermèdia estan equipades amb llums ultraviolada. Les llums ultraviolades de la sala estèril es troben a 1 metre de distància de la superfície de treball. El personal que entri a la sala estèril ha de portar roba i barrets esterilitzats.
Actualment, les sales estèrils existeixen principalment a les fàbriques de microbiologia, mentre que els laboratoris generals utilitzen bancs de neteja. La funció principal del banc de neteja és utilitzar un dispositiu de flux d'aire laminar per eliminar diverses pols petites, inclosos els microorganismes, de la superfície de treball. El dispositiu elèctric permet que l'aire passi a través del filtre HEPA i després entri a la superfície de treball, de manera que la superfície de treball sempre es manté sota el control del flux d'aire estèril. A més, hi ha una cortina d'aire d'alta velocitat al costat proper a l'exterior per evitar que entri aire bacterià extern.
En llocs amb condicions difícils, també es poden utilitzar caixes estèrils de fusta en lloc de bancs de neteja. La caixa estèril té una estructura senzilla i és fàcil de moure. Hi ha dos forats a la part frontal de la caixa, que es bloquegen amb portes push-pull quan no està en funcionament. Podeu estirar els braços cap a dins durant el funcionament. La part superior de la part frontal està equipada amb vidre per facilitar el funcionament intern. Hi ha una làmpada ultraviolada a l'interior de la caixa, i els estris i els bacteris es poden introduir a través d'una petita porta lateral.
Les tècniques operatives asèptiques actualment no només tenen un paper fonamental en la recerca i les aplicacions microbiològiques, sinó que també s'utilitzen àmpliament en moltes biotecnologies. Per exemple, la tecnologia transgènica, la tecnologia d'anticossos monoclonals, etc.
Data de publicació: 06-03-2024