1. Finalitat: Aquest procediment pretén proporcionar un procediment normalitzat per a les operacions asèptiques i la protecció de les sales estèrils.
2. Àmbit d'aplicació: Laboratori de proves biològiques
3. Persona responsable: provador de supervisor de QC
4.Definició: cap
5. Precaucions de seguretat
Realitzeu estrictament operacions asèptiques per evitar la contaminació microbiana; Els operadors han d’apagar la làmpada UV abans d’entrar a l’habitació estèril.
6. Procedències
6.1. L’habitació estèril ha d’estar equipada amb una sala d’operacions estèril i una habitació tampó. La neteja de la sala d’operacions estèril ha d’arribar a la classe 10000. La temperatura interior s’ha de mantenir a 20-24 ° C i la humitat s’ha de mantenir al 45-60%. La neteja del banc net hauria d’arribar a la classe 100.
6.2. L’habitació estèril s’ha de mantenir neta i està estrictament prohibida acumular deixalles per evitar la contaminació.
6.3. Eviteu estrictament la contaminació de tots els equips d’esterilització i els mitjans de cultiu. Els que estan contaminats han de deixar d’utilitzar -los.
6.4. La sala estèril ha d’estar equipada amb desinfectants de concentració de treball, com ara una solució de Cresol del 5%, un 70% d’alcohol, una solució de clormetionina del 0,1%, etc.
6.5. La sala estèril ha de ser esterilitzada i netejada regularment amb un desinfectant adequat per garantir que la neteja de la sala estèril compleixi els requisits.
6.6. Tots els instruments, instruments, plats i altres articles que cal portar a la sala estèril han d’estar embolicats i esterilitzats amb mètodes adequats.
6.7. Abans d’entrar a l’habitació estèril, el personal ha de rentar -se les mans amb sabó o desinfectant, i després canviar -se en roba de treball especial, sabates, barrets, màscares i guants a l’habitació tampó (o netejar les mans de nou amb un 70% d’etanol) abans d’entrar a la sala estèril. Realitzeu operacions a la cambra bacteriana.
6.8. Abans d’utilitzar una habitació estèril, la làmpada ultraviolada a l’habitació estèril s’ha d’encendre per a la irradiació i l’esterilització durant més de 30 minuts, i el banc net s’ha d’encendre per bufar l’aire alhora. Un cop finalitzada l’operació, s’ha de netejar la sala estèril a temps i després esterilitzar -se per llum ultraviolada durant 20 minuts.
6.9. Abans de la inspecció, l’envàs exterior de la mostra de prova s’ha de mantenir intacte i no s’ha d’obrir per evitar la contaminació. Abans de la inspecció, utilitzeu un 70% de boles de cotó alcohol per desinfectar la superfície exterior.
6.10. Durant cada operació, s’ha de fer un control negatiu per comprovar la fiabilitat de l’operació asèptica.
6.11. En absorbir el líquid bacterià, heu d’utilitzar una bola d’aspiració per absorbir -la. No toqueu la palla directament amb la boca.
6.12. L’agulla d’inoculació s’ha d’esterilitzar per flama abans i després de cada ús. Després del refredament, es pot inocular la cultura.
6.13. Les palla, els tubs d’assaig, els plats Petri i altres estris que contenen líquid bacterià s’han de remullar en un cubell d’esterilització que conté un 5% de solució de Lysol per a la desinfecció i es pot treure i esbandir després de 24 hores.
6.14. Si hi ha un líquid bacterià vessat a la taula o al sòl, haureu d’abocar immediatament un 5% de solució d’àcid carbòlic o un 3% de Lysol a la zona contaminada durant almenys 30 minuts abans de tractar -la. Quan la roba i els barrets de treball estan contaminats amb líquid bacterià, s’han de treure immediatament i rentar-los després d’esterilització de vapor d’alta pressió.
6.15. Tots els ítems que contenen bacteris vius han de ser desinfectats abans de ser esbandits sota l’aixeta. Està estrictament prohibit contaminar la claveguera.
6.16. El nombre de colònies a la sala estèril s’ha de comprovar mensualment. Amb el banc net obert, agafeu una sèrie de plats de Petri estèril amb un diàmetre interior de 90 mm i injecteu asèpticament a uns 15 ml de medi de cultiu d’agar nutritius que s’hagi fos i refredat a uns 45 ° C. Després de la solidificació, poseu -la cap per avall a 30 a 35 incubar durant 48 hores en una incubadora. Després de demostrar esterilitat, agafeu de 3 a 5 plaques i poseu -les a l’esquerra, a la meitat i a la dreta de la posició de treball. Després d’obrir la coberta i exposar -les durant 30 minuts, poseu -les cap per avall en una incubadora de 30 a 35 ° C durant 48 hores i traieu -les. examinar. El nombre mitjà de bacteris diversos de la placa d'una zona neta de classe 100 no ha de superar una colònia i el nombre mitjà d'una sala neta de classe 10000 no ha de superar les 3 colònies. Si es supera el límit, la sala estèril hauria de ser desinfectada fins que les inspeccions repetides compleixin els requisits.
7. Consulteu el capítol (mètode d’inspecció d’esterilitat) a “Mètodes d’inspecció higiènica de fàrmacs” i "Pràctiques operatives estàndard de la Xina per a la inspecció de fàrmacs".
8. Departament de distribució: Departament de Gestió de Qualitat
Direcció tècnica neta:
Després d’obtenir un entorn estèril i materials estèrils, hem de mantenir un estat estèril per estudiar un microorganisme conegut específic o utilitzar les seves funcions. En cas contrari, diversos microorganismes des de fora poden barrejar -se fàcilment. El fenomen de la barreja de microorganismes irrellevants des de fora s’anomena bacteris contaminants en la microbiologia. Prevenir la contaminació és una tècnica crítica en el treball microbiològic. L’esterilització completa d’una banda i la prevenció de la contaminació per l’altra són dos aspectes de la tècnica asèptica. A més, hem d’evitar els microorganismes en estudi, especialment els microorganismes patògens o els microorganismes dissenyats genèticament que no existeixen a la natura, des de la fugida dels nostres contenidors experimentals cap a un entorn extern. A aquests efectes, en microbiologia, hi ha moltes mesures.
L’habitació estèril sol ser una petita habitació especialment instal·lada al laboratori de microbiologia. Es pot construir amb llençols i vidre. La zona no ha de ser massa gran, uns 4-5 metres quadrats i l'alçada ha de ser d'uns 2,5 metres. S'ha de configurar una sala de buffer fora de l'habitació estèril. La porta de la sala tampó i la porta de la sala estèril no han d’afrontar la mateixa direcció per evitar que el flux d’aire porti bacteris diversos. Tant l’habitació estèril com l’habitació tampó han d’estar hermètiques. Els equips de ventilació interiors han de tenir dispositius de filtració d’aire. El sòl i les parets de l’habitació estèril han de ser suaus, difícils de fer brutícia i fàcils de netejar. La superfície de treball hauria d’estar a nivell. Tant l'habitació estèril com la sala de buffer estan equipades amb llums ultraviolades. Les llums ultraviolades de la sala estèril es troben a 1 metre de la superfície de treball. El personal que entra a l’habitació estèril ha de portar roba i barrets esterilitzats.
Actualment, les habitacions estèrils existeixen majoritàriament a les fàbriques de microbiologia, mentre que els laboratoris generals utilitzen bancs nets. La funció principal del banc net és utilitzar el dispositiu de flux d’aire laminar per eliminar diverses pols minúscules, inclosos els microorganismes a la superfície de treball. El dispositiu elèctric permet que l’aire passi pel filtre HEPA i després entri a la superfície de treball, de manera que la superfície de treball sempre es manté sota el control de l’aire estèril que flueix. A més, hi ha una cortina d'aire d'alta velocitat al costat a prop de l'exterior per evitar que entri aire bacterià extern.
En llocs amb condicions difícils, també es poden utilitzar caixes estèrils de fusta en lloc del banc net. La caixa estèril té una estructura senzilla i és fàcil de moure. Hi ha dos forats a la part frontal de la caixa, que estan bloquejats per portes push-pull quan no estan en funcionament. Podeu estendre els braços durant el funcionament. La part superior de la part frontal està equipada amb vidre per facilitar el funcionament intern. Hi ha una làmpada ultraviolada dins de la caixa i es poden posar estris i bacteris per la porta petita del costat.
Actualment, les tècniques d’operació asèptica no només tenen un paper fonamental en la investigació i les aplicacions microbiològiques, sinó que també s’utilitzen àmpliament en moltes biotecnologies. Per exemple, la tecnologia transgènica, la tecnologia d’anticossos monoclonal, etc.
Post Horari: 06 de març de 2014