1. Finalitat: Aquest procediment pretén proporcionar un procediment estandarditzat per a operacions asèptiques i protecció de sales estèrils.
2. Àmbit d'aplicació: laboratori d'assaigs biològics
3. Responsable: Controlador de control de qualitat
4.Definició: Cap
5. Precaucions de seguretat
Realitzar estrictament operacions asèptiques per evitar la contaminació microbiana;els operadors haurien d'apagar la làmpada UV abans d'entrar a l'habitació estèril.
6.Procediments
6.1.La sala estèril ha d'estar equipada amb una sala d'operacions estèrils i una sala d'amortiment.La neteja de la sala d'operacions estèril ha d'arribar a la classe 10000. La temperatura interior s'ha de mantenir a 20-24 °C i la humitat s'ha de mantenir al 45-60%.La neteja del banc net hauria d'arribar a la classe 100.
6.2.L'habitació estèril s'ha de mantenir neta i està estrictament prohibit apilar residus per evitar la contaminació.
6.3.Eviteu estrictament la contaminació de tots els equips d'esterilització i medis de cultiu.Els que estiguin contaminats haurien de deixar d'utilitzar-los.
6.4.L'habitació estèril ha d'estar equipada amb desinfectants de concentració de treball, com ara una solució de cresol al 5%, alcohol al 70%, solució de clormetionina al 0,1%, etc.
6.5.L'habitació estèril s'ha d'esterilitzar i netejar regularment amb un desinfectant adequat per garantir que la neteja de la sala estèril compleix els requisits.
6.6.Tots els instruments, instruments, plats i altres articles que s'han de portar a una sala estèril s'han d'embolicar i esterilitzar amb els mètodes adequats.
6.7.Abans d'entrar a la sala estèril, el personal s'ha de rentar les mans amb sabó o desinfectant, i després canviar-se per roba de treball especial, sabates, barrets, màscares i guants a la sala d'amortiment (o netejar-se de nou amb etanol al 70%) abans d'entrar a l'habitació estèril.Realitzar operacions en cambra bacteriana.
6.8.Abans d'utilitzar una habitació estèril, la làmpada ultraviolada a l'habitació estèril s'ha d'encendre per a la irradiació i l'esterilització durant més de 30 minuts, i el banc net s'ha d'encendre per bufar l'aire alhora.Un cop finalitzada l'operació, l'habitació estèril s'ha de netejar a temps i després esterilitzada amb llum ultraviolada durant 20 minuts.
6.9.Abans de la inspecció, l'embalatge exterior de la mostra de prova s'ha de mantenir intacte i no s'ha d'obrir per evitar la contaminació.Abans de la inspecció, utilitzeu boles de cotó al 70% d'alcohol per desinfectar la superfície exterior.
6.10.Durant cada operació, s'ha de fer un control negatiu per comprovar la fiabilitat del funcionament asèptic.
6.11.Quan s'absorbeix el líquid bacterià, cal utilitzar una bola de succió per absorbir-lo.No toqueu la palla directament amb la boca.
6.12.L'agulla d'inoculació s'ha d'esterilitzar amb flama abans i després de cada ús.Després del refredament, el cultiu es pot inocular.
6.13.Les palletes, tubs d'assaig, plaques de Petri i altres estris que continguin líquid bacterià s'han de remullar en una galleda d'esterilització que contingui una solució de lisol al 5% per a la desinfecció, i s'han de treure i esbandir després de 24 hores.
6.14.Si hi ha líquid bacterià vessat a la taula o al terra, heu d'abocar immediatament una solució d'àcid carbòlic al 5% o un 3% de lisol a la zona contaminada durant almenys 30 minuts abans de tractar-la.Quan la roba de treball i els barrets estan contaminats amb fluid bacterian, s'han de treure immediatament i rentar-los després de l'esterilització amb vapor d'alta pressió.
6.15.Tots els articles que continguin bacteris vius s'han de desinfectar abans d'esbandir-los sota l'aixeta.Està estrictament prohibit contaminar el clavegueram.
6.16.El nombre de colònies a l'habitació estèril s'ha de comprovar mensualment.Amb el banc net obert, agafeu diverses plaques de Petri estèrils amb un diàmetre interior de 90 mm i injecteu asèpticament uns 15 ml de medi de cultiu d'agar nutritiu que s'hagi fos i refredat a uns 45 °C.Després de la solidificació, col·loqueu-lo cap per avall a 30-35 Incubar durant 48 hores en una incubadora ℃.Després de comprovar l'esterilitat, agafeu de 3 a 5 plaques i col·loqueu-les a l'esquerra, al mig i a la dreta de la posició de treball.Després d'obrir la tapa i exposar-les durant 30 minuts, col·loqueu-les cap per avall en una incubadora de 30 a 35 °C durant 48 hores i traieu-les.examinar.El nombre mitjà de bacteris diversos a la placa en una àrea neta de classe 100 no ha de superar 1 colònia, i el nombre mitjà en una sala neta de classe 10000 no ha de superar les 3 colònies.Si se supera el límit, la sala estèril s'ha de desinfectar a fons fins que les inspeccions repetides compleixin els requisits.
7. Consulteu el capítol (Mètode d'inspecció d'esterilitat) a "Mètodes d'inspecció higiènica de drogues" i "Pràctiques operatives estàndard de la Xina per a la inspecció de drogues".
8. Departament de Distribució: Departament de Gestió de Qualitat
Orientació tècnica de la sala blanca:
Després d'obtenir un entorn estèril i materials estèrils, hem de mantenir un estat estèril per tal d'estudiar un microorganisme conegut específic o utilitzar les seves funcions.En cas contrari, es poden barrejar fàcilment diversos microorganismes de l'exterior. El fenomen de la barreja de microorganismes irrellevants de l'exterior s'anomena bacteris contaminants en microbiologia.La prevenció de la contaminació és una tècnica crítica en el treball microbiològic.L'esterilització completa d'una banda i la prevenció de la contaminació de l'altra són dos aspectes de la tècnica asèptica.A més, hem d'evitar que els microorganismes objecte d'estudi, especialment els microorganismes patògens o els microorganismes modificats genèticament que no existeixen a la natura, escapen dels nostres contenidors experimentals al medi extern.A aquests efectes, en microbiologia, hi ha moltes mesures.
La sala estèril sol ser una petita habitació especialment instal·lada al laboratori de microbiologia.Es pot construir amb làmines i vidre.L'àrea no ha de ser massa gran, uns 4-5 metres quadrats, i l'alçada ha de ser d'uns 2,5 metres.S'ha d'establir una sala d'amortiment fora de la sala estèril.La porta de la sala d'amortiment i la porta de la sala estèril no haurien d'estar orientades a la mateixa direcció per evitar que el flux d'aire introdueixi bacteris diversos.Tant la sala estèril com la sala tampó han de ser hermtiques.Els equips de ventilació interior han de disposar de dispositius de filtració d'aire.El sòl i les parets de la sala estèril han de ser llises, difícils d'acollir brutícia i fàcils de netejar.La superfície de treball ha d'estar plana.Tant la sala estèril com la sala tampó estan equipades amb llums ultravioletes.Els llums ultraviolats de l'habitació estèril estan a 1 metre de la superfície de treball.El personal que entra a la sala estèril ha de portar roba i barrets esterilitzats.
Actualment, les sales estèrils existeixen majoritàriament a les fàbriques de microbiologia, mentre que els laboratoris generals utilitzen banc net.La funció principal del banc net és utilitzar un dispositiu de flux d'aire laminar per eliminar diverses pols diminutes, inclosos els microorganismes de la superfície de treball.El dispositiu elèctric permet que l'aire passi a través del filtre hepa i després entri a la superfície de treball, de manera que la superfície de treball es manté sempre sota el control de l'aire estèril que flueix.A més, hi ha una cortina d'aire d'alta velocitat al costat proper a l'exterior per evitar l'entrada d'aire bacterià extern.
En llocs amb condicions difícils, també es poden utilitzar caixes estèrils de fusta en lloc d'un banc net.La caixa estèril té una estructura senzilla i és fàcil de moure.Hi ha dos forats a la part davantera de la caixa, que estan bloquejats per portes push-pull quan no estan en funcionament.Podeu estendre els braços durant l'operació.La part superior del frontal està equipada amb vidre per facilitar el funcionament intern.Hi ha una làmpada ultraviolada a l'interior de la caixa i els estris i els bacteris es poden introduir per una petita porta lateral.
Actualment, les tècniques operatives asèptiques no només tenen un paper fonamental en la investigació i aplicacions microbiològiques, sinó que també s'utilitzen àmpliament en moltes biotecnologies.Per exemple, tecnologia transgènica, tecnologia d'anticossos monoclonals, etc.
Hora de publicació: 06-mar-2024